細胞實驗

細胞是生命活動的基本結構和功能單位，細胞水平的實驗技術手段在生命科學研究中充當了至關重要的角色，尤其在動植物遺傳和發育的科研領域發揮了不可或缺的作用。赫貝搭建細胞生物學技術服務平臺可提供專業的細胞生物學實驗技術服務以及細胞生物學類整體實驗技術服務。服務項目涵蓋了從細胞培養、質粒轉染，到細胞建模、樣本收集，到細胞生物學功能檢測整個科研流程，并可搭配分子生物學、慢病毒感染、蛋白組學、基因芯片、動物建模、免疫學，病理學等，實現整個課題項目的研發。

細胞培養相關服務

細胞的體外培養技術，即對離體細胞在體外模擬體內環境，使之繼續生存、生長、繁殖的一種方法。細胞培養技術是生物技術中核心、基礎的技術。赫貝提供多種細胞株的培養，并可從人、大小鼠、兔及其它動物組織中，對原代細胞進行分離、培養和鑒定。

1、原代細胞培養服務（周期：4-6周）

原代細胞培養是指將機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。原代培養細胞離體時間短，性狀與體內相似，適用于研究。一般說來，幼稚狀態的組織和細胞，如：動物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進行原代培養。

2、細胞轉染（周期：4-8周）

常規轉染技術可分為兩大類，一類是瞬時轉染，一類是穩定轉染（性轉染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，雖然可以達到高水平的表達，但通常只持續幾天，在轉染后24-72小時內分析結果。后者外源質粒DNA整合到宿主細胞染色體上，使宿主細胞可長期表達目的基因及蛋白，需要在瞬時轉染基礎上對靶細胞進行篩選，篩選得到的細胞可穩定表達目的蛋白，用于蛋白的擴增及富集；或得到穩定沉默特定基因的細胞株。

赫貝提供細胞瞬時轉染及穩定細胞株構建服務，并可通過免疫熒光、PCR及Western Blot 驗證基因及蛋白高表達。

3、細胞增殖及細胞毒性相關檢測（周期：3-4周）

細胞增殖的研究方法有很多，主要包括BrdU、EdU、CCK8、MTT等。赫貝主要使用MTT和CCK8兩種試劑測定細胞生長曲線，也提供Brdu和Edu染色通過流式細胞術鑒定細胞增殖能力。

4、流式細胞術檢測（FACS）服務（周期3-4周）

流式細胞術（flow cytometry, FCM)是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是①測量速度快；②可進行多參數測量；③是一門綜合性的高科技方法（ 流式細胞術綜合了光學，電子學，流體力學，細胞化學，免疫學，激光和計算機等多門學科和技術）；④既是細胞分析技術，又是的分選技術。

赫貝可根據客戶實驗方案對細胞進行藥物刺激后通過單染（PI）或雙染（PI+Annexin V）細胞，利用流式細胞術（FACS）進行細胞周期或者細胞凋亡檢測，同時可進行免疫細胞分型、細胞分選、表面抗原鑒定等服務。

5、細胞遷移與侵襲（Transwell）（周期4-8周）

細胞遷移與侵襲是指將Transwell小室放入培養板中，小室內稱上室，培養板內稱下室，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔，將研究的細胞接種在上室內，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞。赫貝提供多種不同孔徑和經過不同處理聚碳酸酯膜，可幫助客戶進行共培養、細胞趨化、細胞遷移和細胞侵襲等多種課題的研究。

6、細胞自噬（周期：2-3周）

細胞自噬是指一些需降解的蛋白質和細胞器等胞漿成分被包裹，并終運送至溶酶體降解的過程。自噬的研究已經成為繼凋亡之后生物醫學熱門的領域之一，除維持生理狀態下機體的穩態功能外，越來越多的研究表明自噬失調可能與腫瘤、感染、神經退行性變等疾病相關。

赫貝采用先進的透射電鏡觀察和免疫熒光檢測方法，可實時監控自噬體產生和降解的全過程，還可通過對自噬通路的調控來評價自噬功能對細胞行為或機體功能的影響，如自噬抑制或激活劑、自噬相關基因的敲除及沉默等。

7、細胞劃痕（周期2-4周）

細胞劃痕（修復）法是簡捷測定細胞遷移運動與修復能力的方法，類似體外傷口**模型，在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央區域劃線，去除中央部分的細胞，然后繼續培養細胞至實驗設定的時間（例如72h），取出細胞培養板，觀察周邊細胞是否生長（修復）至中央劃痕區，以此判斷細胞的生長遷移能力。與transwell相比，細胞劃痕實驗具有經濟、操作方便等優勢。

8、其他細胞實驗服務：

1、原位末端凋亡法（TUNEL）檢測

2、細胞毒理學試驗服務

3、細胞藥效學實驗服務

4、細胞分子生物學實驗服務

5、電鏡檢測

6、激光共聚焦顯微鏡檢測

7、熒光顯微鏡檢測